高效液相色谱仪中，强溶剂使溶质在填料表面的吸附减少，相应的容量因子k值减小；较弱的溶剂使溶质在填料表面的吸附增加，相应的容量因子k值增大。因此，k值是流动相组成的函数。理论塔板数一般与流动相的粘度成反比。

高效液相色谱仪对流动相性质的要求如下：
1、流动相应不改变填料的任何性质：
低交联度的离子交换树脂和排阻色谱填料有时遇到某些有机相会溶胀或收缩，从而改变色谱柱填床的性质。
碱性流动相不能用于硅胶柱系统。
酸性流动相不能用于氧化铝和氧化镁等吸附剂的柱系统。  
2、纯度高：
色谱柱的寿命与大量流动相通过有关，特别是当溶剂所含杂质在柱上积累时。
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