一、对色谱柱的直接影响

1.气泡进入色谱柱

当流动相跑空时，泵会吸入空气，这些气泡可能会进入色谱柱。虽然HPLC的泵通常设计成不适合长时间输送气体，但在泵停止之前，一些气泡可能会进入柱子。气泡的存在会干扰流动相的流动，导致流速不稳定，进而影响色谱分析的准确性和重复性。

2.溶剂突然减少或中断

流动相跑空意味着色谱柱内的溶剂突然减少或中断，这会导致样品在柱内的传质过程受到影响。具体来说，样品可能会在柱内滞留时间过长，造成峰形展宽和分辨率降低。此外，样品与固定相的相互作用也会减弱，导致保留时间缩短和灵敏度下降。
3.柱子内部可能干涸：在情况下，如果流动相长时间跑空，色谱柱内部可能会干涸。这会导致柱效显著降低，甚至可能损坏色谱柱。

二、对色谱柱的间接影响

1.泵和密封垫的损坏

流动相跑空不仅影响色谱柱，还可能对泵和密封垫造成损坏。因为流动相还充当了活塞和密封垫之间的润滑剂，没有了流动相的润滑作用，密封垫很容易磨损。长时间在缺少流动相的情况下运行泵，还可能导致泵内部的密封圈损坏，进而影响泵的性能和寿命。

2.系统压力异常

流动相跑空后，系统内的压力可能会发生异常变化。这可能会导致单向阀、泵、柱子和检测器等部件堵塞或损坏。因此，在重新启动系统之前，必须仔细检查并排除这些潜在问题。

三、处理措施

1.立即停泵并断开管路

停泵：发现流动相跑空后，首先要立即停止泵的运行，以防止进一步的损坏。

断开管路：将流动相到脱气机等设备的管路断开，防止空气继续进入系统。

2.排气和清洗

排气：使用注射器或其他工具，将泵及管路中的空气排出。可以打开冲洗阀，以较大的流速（如3-5ml/min）进行排气，确保系统内的气泡被清除。

清洗泵和管路：换上足量的新流动相，通过泵进行循环清洗，以去除可能残留的杂质和气泡。

3.检查并更换密封圈

检查密封圈：长时间的干磨可能导致泵内部的密封圈磨损。因此，需要检查密封圈的状况，如果发现磨损严重，应及时更换。

进行压力和泄漏测试：为了确认密封圈的性能，可以进行压力和泄漏测试。这有助于及时发现并解决问题，避免进一步的损坏。

4.冲洗色谱柱

正相色谱柱：使用正己烷/异丙醇=90/10 以较低的流速（如0.5ml/min）冲洗色谱柱，再更换为目标流动相稳定系统至基线平稳且确认柱子内无气泡为止。

反相色谱柱：使用纯甲醇或纯乙腈以较低的流速（如0.5ml/min）进行冲洗，直至基线稳定且确认柱子内无气泡为止。这一步骤有助于恢复色谱柱的性能并去除可能残留的空气。

逐步增加流速：在确认色谱柱无问题后，可以逐步增加流速至正常分析所需的流速，以确保色谱柱的稳定性和分离效果。

5.设置保护参数

设置压力：在仪器软件中设置泵运行的压力值。当流动相不足导致压力下降时，泵将自动停止工作，以保护仪器不受损坏。

监控流动相体积：设置溶剂瓶里流动相的实际体积以及最小允许运行的体积。软件可以根据流速和时间自动计算溶剂瓶内的剩余流动相量，并在到达最小允许运行的体积时自动停止运行。

6.重新进样实验

在完成上述步骤并确认仪器恢复正常后，可以进行重新进样实验。通过比较实验数据的前后变化，评估流动相跑空对实验结果的影响程度。

7.预防措施

定期检查和维护：定期对仪器设备进行检查和维护，确保各部件的正常运行和性能稳定。

遵守操:作规程严格遵守操作规程，避免操作失误导致的流动相跑空等问题的发生。

通过以上步骤和措施，可以有效地处理流动相跑空的问题，并恢复仪器的正常运行。同时，采取必要的预防措施可以减少类似问题的发生频率，提高实验数据的准确性和可靠性。

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