（二）菌种的置入和培养：

　　1.检查取样室内门并关紧；

　　2.打开取样室外门，将菌种放入取样室后即关上外门；

　　3.取样室充氮置换三次过程：打开真空泵，先抽真空度500ml汞柱（66kPa）以上停，然后人工打开氮气阀2进气，使指针回复零位，关掉阀2。第二次重复操作一次。第三次操作时，使真空度500ml汞柱（66kPa）以上停，然后打开阀4进混合气，使指针回复零位，关掉阀

青岛厌氧培养箱YQX-II手套厌氧箱技术参数：

青岛厌氧培养箱YQX-II手套厌氧箱一、操作室厌氧环境形成：

　　按使用要求放置好必要的配件和器具，并向操作室内放入两个五毒塑料袋。打开设备后配，电源开关后，按控制牌上的总电源键，使设备通电。先用橡皮管插入操作室内进气口，另一个插入塑料袋，接通氮气进气路，打开厌氧培养箱操作室氮气控制阀，使两只塑料袋充足氮气后，关闭电磁阀，然后扎紧袋口，把乳胶手套套在观察板法兰圈上并扎紧，把塑料袋内氮气渐渐的放于操作室内，至全部防除。厌氧培养箱操作室内打开钯粒除氧剂，接通除氧催化器电源进行催化除氧，并在厌氧指示条反应区上滴一点洁净水，1-2小时后，观察其变况，反应部分深蓝色变为浅蓝为操作室内达到厌氧环境。

　　二、菌种的置入和培养：

　　检查厌氧培养箱取样室内门有没有关紧，打开取样室外门，将菌种放入取样室后即关上外门，取样室充氮置换三次过程，然后打开取样室氧气阀进气，使指针回复零位，关掉阀门。厌氧培养箱需要长期连续使用的条件，每天在操作室内放入指示条观察，如不能正常就必须重新换气，要长期连续输入微量的混合气体，使补进的氮气能和微量的氮结合通过催化吸收，保证了室内厌氧状态，补入混合气流量选定为每分钟10毫升左右，连续培养运行一天，更换一次除氧剂和干燥剂。

一、操作室厌氧环境形成

1 按使用要求放置好必要的配件和器具，并向操作室内放入二个无毒塑料袋。

2 通电源开照明灯，开控温仪，调节所需温度及安全温度。

3 操作室内放入1000g钯粒(封闭)和500g干燥剂,并放入美兰指示剂(封闭)。

4 关紧取样室内外门，并抽真空校验。

5 操作室内DI一次置换（氮气置换）：

（1）先用橡皮管插入操作室内进气口，另一头插入塑料袋。

（2）接通氮气进气路，打开氮气控制阀，使二只塑料袋充足氮气，然后扎紧袋口。

（3）把乳胶手套套在观察板法兰圈上并扎紧。

（4）把塑料袋内氮气渐渐地放于操作室内，至全部放出。

6 操作室DI二次置换（氮气置换）重复一 次充氮过程，并注意随时用脚踏开关开闭排气。

7 操作室DI三次置换（混合气体置换）：

（混合气体配比为：N2↑ 85% H2 ↑ 10% CO2↑ 5%）

（1）调换气路打开混合气道通阀门进气，充气时要随时脚踏开关开闭排气。

（2）混合气充满塑料袋后，关掉混合气直通阀（三通阀），使混合气经过流量计输入操作并调整流量计，流量为每分钟10毫升左右。

（3）把塑料袋内混合气渐渐排于操作室内。

（4）通过三次换气后，操作室内气体含氧量已处于极微量状态。

8 操作室内打开钯粒除氧剂，接通除氧催化器电源进行催化除氧，一 小时后打开美兰指示剂（美兰安瓶）观察其变况，不变色为操作室内达到厌氧环境。

9 开紫外线灭菌灯，室内进行灭菌处理。灭菌时间自定。